OSN-SAbstraktOSN-E

Kvantitativní stanovení glukózy v séru, plazmě, v moči a mozkomíšním moku (likvoru) enzymatickým testem soupravou ROCHE GLUC3 na biochemickém analyzátoru ROCHE Cobas 6000, c501.

OSN-SSeznam souvisejících dokumentů a textůOSN-E

Laboratorní příručka

Příručka kvality

Provozní řád

S-OKBH-004 Směrnice pro IKK

S-OKBH-005 Směrnice EHK

S-OKBH-019 Verifikace postupů měření

PI-OKBH-18 Manuál analyzátoru Cobas c501/6000

PI-OKBH-04 Práce s LIPOCLEAR

Příbalový leták Roche Cobas GLUC3 pro kvantitativní stanovení GLU, kat.č. REF04404483190

Příbalový leták pro Systémový kalibrátor Roche C.f.a.s., katalogové číslo 10759350190

Příbalový leták konkrétního používaného tekutého kontrolního materiálu společnosti Biorad,Liquichek^TM

OSN-SKódy a názvy v různých klasifikačních systémechOSN-E

sérum/plasma

GLU, GLUK, Glykémie, D-glukóza, α-D-glukopyranoza

Reagenční souprava: ROCHE GLUC3, kat.č. REF04404483190

Název v lokálním číselníku LIS: Glukóza

Klíč v lokálním číselníku LIS: GLU

Číslo metody v lokálním číselníku LIS: 32

Kód metody v analyzátoru: 717

Název metody v analyzátoru: GLU

Seznam zdravotních výkonů VZP: 81155 Glukóza STATIM

81439 Glukóza

moč

Glykosurie, GLU - U, GLUK -U

Reagenční souprava: ROCHE GLUC3, kat.č. REF04404483

Název v lokálním číselníku LIS: U_Glukóza v moči

Klíč v lokálním číselníku LIS: UGLU (koncentrace v mmol/l)

Číslo metody v lokálním číselníku LIS: 217

Kód metody v analyzátoru: 717

Název metody v analyzátoru:GLU ,typ vzorku urine

Název v lokálním číselníku LIS: U_Glukóza-odpad

Klíč v lokálním číselníku LIS: FUGLU (odpad v mmol/d)

Číslo metody v lokálním číselníku LIS: 218

Výpočtová metoda: FU_UGLU=UGLU*U_obj./1000

U_obj.=objem moči za 24hod (ml)

Seznam zdravotních výkonů VZP: 81155 Glukóza STATIM

81439 Glukóza

Mozkomíšní mok (tekutina) = likvor = CSF (cerebrospinal fluids)

Glukóza v likvoru, GLUK v CSF, CSF-GLU

Reagenční souprava: ROCHE GLUC3, kat.č. REF04404483

Název v lokálním číselníku LIS: Csf_Glukóza

Klíč v lokálním číselníku LIS: CSFGLU

Číslo metody v lokálním číselníku LIS: 492

Kód metody v analyzátoru: 717

Název metody v analyzátoru: GLUK, typ vzorku CSF (likvor)

Seznam zdravotních výkonů VZP: 81155 Glukóza STATIM

81439 Glukóza

OSN-SPrincipOSN-E

Glukóza je za přítomnosti adenosintrifosfátu (ATP) a hořečnatých iontů přeměňována hexokinázou (HK) na glukózo-6-fosfát. Ten je specificky oxidován glukózo-6-fosfát dehydrogenázou (G6P-DH) na glukonát-6-fosfát za současné redukce NADP+ na NADPH. Přírůstek absorbance při 340 nm způsobený zvýšením koncentrace NADPH je úměrný koncentraci glukózy ve vzorku.

Glukóza + ATP ^{HK ,
Mg2+}Glukózo-6-fosfát + ADP

Glukózo-6-fosfát + NAD⁺ ^G6P-DH Glukonát-6-fosfát + NADH+H

OSN-SMísto provádění postupuOSN-E

OKBH, úsek biochemický, Nemocnice AGEL Ostrava - Vítkovice a.s., Zalužanského 1192/15, 703 84 Ostrava-Vítkovice

OSN-SBezpečnostní aspektyOSN-E

Je nutné dodržovat obecné zásady bezpečnosti práce podle směrnici směrnice VN BOZP č.8.02, ale i zásady práce s biologickým materiálem, který může být zdrojem přenosu některých infekcí. Zejména je třeba zachovávat pravidla osobní hygieny, používat osobní ochranné pracovní prostředky (oděv, obuv a podobně), při práci nejíst, nepít a nekouřit. Po práci a před jídlem omýt pokožku především rukou teplou vodou a mýdlem a ošetřit vhodným reparačním krémem. Při zasažení očí vymývat velkým množstvím vlažné vody nejméně 15 minut. Při zasažení oděvu a kůže odložit veškeré kontaminované oblečení. Okamžitě kůži omýt velkým množstvím, pokud možno vlažné vody, popř. mýdlem nebo jiným vhodným mycím prostředkem. Při náhodném požití vypláchnout ústa, dát vypít asi 1/2 litru vody a vyhledat lékařskou pomoc.

OSN-SFáze před vyšetřenímOSN-E

Stanovení glukózy v biologických tekutinách patří k základním a nejčastěji prováděným laboratorním stanovením. Pro správnost výsledku je nezbytné znát časový údaj mezi odběrem krve a posledním jídlem.

Vzhledem k nestabilitě glukózy by se měl provádět odběr do zkumavek s antiglykolytickými přísadami.

Glukóza je vedle vyšších mastných kyselin, nejdůležitějším zdrojem energie pro organismus. Do organismu se glukóza dostává potravou po rozštěpení cukrů v gastrointesticiálním traktu. Vstřebává se do krve a tkání (játra, svaly, tuková a mozková tkáň), kde se buď využívá jako přímý zdroj energie, nebo se ukládá do zásoby ve formě glykogenu. Poločas katabolismu glukózy je cca 20 minut. Plynulá dodávka, správná utilizace glukózy je pro organismus velmi důležitá, protože zásoba glykogenu postačí jen na krátkou dobu. Nedostatek glukózy je kritický zvlášť pro buňky, které nedovedou využít jiný zdroj energie (například erytrocyty). Při nedostatku glukózy dochází k její tvorbě z nesacharidových prekurzorů (aminokyseliny, glycerol, laktát). Metabolismus glukózy je řízen celou řadou regulačních systémů. Pankreatický inzulin podporuje utilizaci glukózy, katecholaminy potlačují sekreci inzulinu, glukagon podporuje uvolňování glukózy z glykogenu (glykogenolýza). Porušením rovnováhy těchto regulačních mechanizmů může způsobit trvalou hyper nebo hypoglykémii a snížení tolerance na zátěž glukózou.

Indikací pro vyšetření glukózy v krvi je především:

- screeningové vyhledávání diabetes mellitus

- upřesnění diagnostiky diabetes mellitus

- kontrola účinnosti léčby

Vyšetřování glukózy v moči slouží jako hrubý indikátor ztrát glukózy. Snížení hladiny svědčí o bakteriální infekci (obdobně v likvoru).

OSN-SOdběr primárního vzorku a transportOSN-E

Odběr

Sérum: Odběr se provádí standardním způsobem ze žilní krve, do plastové zkumavky

s aktivátorem srážení nebo se separačním gelem za použití uzavřeného odběrového systému. Speciální příprava pacienta ani dieta není nutná, ale pro obvyklé vyšetřování je vhodný odběr ráno nalačno.

Plazma: Li-heparin, K2-EDTA s NAF, K2-EDTA+NAF+citrát

Nejvhodnější odběr je EDTA plazma s NaF. Tento odběr se vždy provádí, jestliže je u pacienta požadován orální glukózo-toleranční test. PI-OKBH-07 Provedení o-GTT

Moč: Pro stanovení v moči se doporučuje odběr 24 hodinového vzorku moče bez přídavku

konzervačních činidel. Je nutné změřit celkový objem moče s přesností na 10 ml a po dokonalém promíchání, odlít vzorek do vhodné odběrové nádoby a co nejrychleji donést do laboratoře.

Likvor: Odběr do polystyrenu bez úprav - zpracovat co nejrychleji, centrifugovat do 1 hodiny

po odběru.

Při odběru primárního vzorku se postupuje podle pracovní instrukce PI-OKBH-19 Odběr vzorku.

Transport

Transport materiálu na oddělení OKBH VTN je popsán ve směrnici S-OKBH-006 Směrnice pro transport a příjem vzorků.

Skladování

Sérum/plazma je na OKBH po provedení analýzy skladováno v lednici při +2 až + 8°C po dobu 2 dnů pro potřeby dodatečně požadovaných vyšetření. Doba dodatečně požadovaných vyšetření se řídí podle seznamu uvedeném v LP C-03 Ústní požadavky na vyšetření.

V případě delšího skladování pro potřebu analýzy, je sérum/plazma skladováno zamraženo při teplotě -20°C po dobu maximálně 1 měsíce.

Moč je po provedení analýzy a zkontrolování výsledků likvidována.

Likvor je skladován po provedení analýz a zkontrolování výsledků 30 dní v ledničce pouze pro identifikaci materiálu. Výjimečně, v případě delšího skladování pro potřebu analýzy, je likvor skladován zamražená při teplotě -20°C po dobu maximálně 6 měsíců.

Interference sérum/plazma

Stanovení ovlivňuje hemolýza je-li koncentrace hemoglobinu > 621 µmol/l

Stanovení ovlivňuje koncentrace konjugovaného a nekonjugovaného bilirubinu, je- li >1026 µmol/l

Stanovení ovlivňuje lipémie je-li index L > 1000

Interference moč

léčiva viz příbalový leták

Stabilita měřené veličiny v séru dle příbalového letáku

+15 až +25°C:8 hodin, +2 až +8°C: 3 dny

Stabilita měřené veličiny ve fluoridové plazmě dle příbalového letáku

+15 až +25°C: 3 dny

Stabilita měřené veličiny v moči dle příbalového letáku

+18 až +26°C: 24 hodin pouze s konzervací 5ml ledové k.octové, proto bez konzervace vyšetření provést co nejdříve po odběru.

Stabilita měřené veličiny v likvoru dle příbalového letáku skladovat při +4 °C , vyšetření provést co nejdříve po odběru

OSN-SOmezeníOSN-E

Laboratoř může odmítnout přijetí materiálu a neprovést požadované vyšetření z obecných důvodů uvedených v Laboratorní příručce v kapitole kritéria pro přijetí nebo odmítnutí primárních vzorků.

OSN-SManipulace se vzorkyOSN-E

Manipulace se vzorky probíhá podle běžných zásad práce s biologickým infekčním materiálem uvedených v Laboratorní příručce a Příručce kvality.

Primární zkumavka s biologickým materiálem je centrifugována 10 minut při rychlosti 2000 g (rcf)

Resp. 3333 ot/min. Po centrifugaci je odeslána k analýze. Vzorky obsahující sraženinu musí být před analýzou opět centrifugovány.

OSN-SPřístroje a pomůckyOSN-E

Centrifuga

Analyzátor Cobas 6000, modul c501

OSN-SReagencieOSN-E

Souprava pro biochemický analyzátor Cobas c 501 GLUC3 – 800 testů

Diluent NaCl 9%

Výrobce soupravy: Roche diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim

Dodavatel soupravy: Roche s.r.o., Diagnostics division, Na Valentince 336/4, 150 00 Praha - 5

reagencie

obsah reagencie

MES pufr: 5mmol/l, pH 6,0

Mg 2^+:24,0 mmol/l

ATP: ³ 4,5 mmol/l

NADP^:³7,0 mmol/l

konzervans

HEPES pufr: 200 mmol/l, pH 8,0

Mg2^+:4,0 mmol/l

HK (kvasinky): ³ 300 mkat/l

G6P-DH (E.coli): ³ 300 mkat/l

konzervans

Skladování: Reagencie jsou skladovány v lednici při teplotě +2 až + 8 °C

Stabilita: Neotevřené reagencie jsou stabilní do označené doby exspirace při +2 až + 8 °C.

Stabilita v analyzátoru: 8 týdnů, Diluent NaCl 9 % 12 týdnů

Manipulace s reagenciemi: reagencie jsou připraveny k použití do analyzátoru bez úprav.

Ověřování kvality: Provádí se denně pomocí interní kontroly kvality.

OSN-SSpotřební materiálOSN-E

Odběrové nádobky

Špičky k automatickým pipetám

OSN-SPříprava k činnostiOSN-E

Přístroj se uvede do stavu STAND BY dle návodu v manuálu analyzátoru PI-OKBH-18 Manuál analyzátoru Cobas c501/6000.

Silně chylózní vzorky běžně nezpracováváme. Jestliže lékař stanovení glukózy požaduje, postupujeme podle návodu pro práci s LIPOCLEAR PI-OKBH-04 Práce s LIPOCLEAR.

OSN-SPracovní postupOSN-E

Množství pipetovaného vzorku séra, plazmy, moče, likvoru: 2,0 µl

Přesný popis analýzy včetně ovládání přístroje, je uveden v manuálu analyzátoru PI-OKBH-18 Manuál analyzátoru Cobas c501/6000.

Záznamy o pravidelné údržbě analyzátoru jsou uvedeny v provozním deníku.

Denně, před vlastním měřením vzorků, se provede kontrola kvality v kontrolních sérových materiálech na dvou hladinách. S-OKBH-004 Směrnice pro IKK.

Denně, před vlastním měřením vzorků, se provede kontrola kvality v kontrolních močových materiálech na hladině 1 a 2. S-OKBH-004 Směrnice pro IKK.

V případě, že výsledky kontrolních materiálů neodpovídají nastavenému tolerančnímu rozmezí, musí se nalézt a odstranit závada, eventuálně provést nová kalibrace a následně zopakovat kontrola kvality.

Vyhovuje-li naměřený výsledek očekávané hodnotě kontrolního materiálu, je možné přistoupit k vkládání vzorků do přístroje. Vzorky označené čárovým kódem jsou kontrolovány na přítomnost hemolýzy, chylozity a jsou vkládány do šedých stojánků na posuvný pás Roche cobas 6000.Pokud je biologického materiálu málo přepipetuje se do hitachi kepu, který se umístí do jiné plastové zkumavky označené čárovým kódem.

Pokud je analyzátor ve stavu STAND BY, stiskneme ikonu START v základní obrazovce řídícího počítače pro zahájení analýzy, která dále probíhá automaticky.

Požadavky na analýzy se do analyzátoru přenášejí počítačovou sítí prostřednictvím laboratorního informačního systému (LIS) nebo se mohou zadávat ručně pomocí klávesnice řídícího počítače analyzátoru.

Výsledky se z analyzátoru automaticky přenáší zpět do LIS ke kontrole a schválení, které provádí pověřený pracovník.

Obsluha analyzátoru se řídí vnitřními bezpečnostními a hygienickými předpisy laboratoře a pracovní instrukcí

PI-OKBH-18 Manuál analyzátoru Cobas c501/6000.

OSN-SStručný popis postupuOSN-E

1. Vloží se reagenční souprava.

2. V případě potřeby se provede kalibrace.

3. Vloží se analyzované vzorky do šedého stojánku, který se umístí na posuvný pás

4. Pokud je analyzátor ve stavu STANDBY, stiskne se ikona START a tím se zahájí analýza, která dále probíhá automaticky.

5. Výsledky testů jsou průběžně z přístroje odesílány do systému LIS, kde jsou kontrolovány.

OSN-SKalibrace a návaznostOSN-E

Přesný popis kalibrace metody je uveden v manuálu analyzátoru PI-OKBH-18 Manuál analyzátoru Cobas c501/6000.

Ke kalibraci metody pro sérum (plazmu) se používá kalibrátor C.f.a.s., kat.č. 10759350190, který je připraven z lidských sér s chemickými aditivy a příslušnými enzymy lidského, zvířecího a rostlinného původu s deklarovanou hodnotou pro GLUKOSU.

Návaznost:

Metoda je standardizována podle ID/MS

Příprava kalibrátoru:

Kalibrátor je dodáván v lyofilizovaném stavu.

Doporučený postup rekonstituování lyofilizovaného kalibrátoru:

1.Opatrně otevřít lahvičku a vyjmout gumovou vložku. Přitom věnovat maximální pozornost zabránění ztrátám lyofilizovaného materiálu zachyceného na gumové vložce.

2.Přidat do lahvičky přesně 3,0 ml vody Aqua pro injectione Braun.

3.Uzavřít gumovou vložkou a po 30 minutách opatrně promíchat (netřepat!) až do kompletního rozpuštění obsahu.

Stabilita: Lyofilizovaný kalibrátor je stabilní do doby exspirace vyznačené na obalu při skladování v lednici +2 až + 8°C. Otevřený a rekonstituovaný materiál je stabilní 2 dny uložený v lednici při +2 až + 8 °C. Alikvoty kalibrátoru se uchovávají v mrazáku při teplotě -20 °C po dobu max.30dní.

Vlastní kalibrace:

Kalibrace je 2-bodová, typ 2-Point End a provádí se pomocí sérové matrice v odpovídajícím černém kalibračním stojánku, nulový bod je deionizovaná voda tzv. reagenční blank.

Bezprostředně po provedení kalibrace se musí provést kontrola kvality.

Frekvence kalibrace:

Provádí se při změně šarže reagencie a dále podle potřeby v souvislosti s vyhodnocováním kontroly kvality a stability kalibrace reagencie v přístroji.

OSN-SCharakteristika spolehlivostiOSN-E

Charakteristika spolehlivosti dle příbalového letáku:

Rozsah měření v séru, plazmě, moči a CSF:

Při stanovení glukózy v séru, plazmě, moči a CSF je oblast linearity 0,11 až 41,6 mmol/l.

Mez detekce,mez stanovitelnosti : 0,11 mmol/l viz.příbalový leták

Sérum, plazma:

OPAKOVATELNOST

V sérii	Průměr [mmol/l]	SD [mmol/l]	CV [%]
Precinorm U	5,49	0,05	1
Precipath U	13,6	0,1	0,9
Lidské sérum 1	7,74	0,05	0,7
Lidské sérum 2	5,41	0,04	0,7

MEZILEHLÁ PRECIZNOST

Celkem	Průměr [mmol/l]	SD [mmol/l]	CV [%]
Precinorm U	5,38	0,07	1,3
Precipath U	13,4	0,2	1,1
Lidské sérum 3	7,61	0,09	1,2
Lidské sérum 4	5,28	0,04	1,1

MOČ:

OPAKOVATELNOST

V sérii	Průměr [mmol/l]	SD [mmol/l]	CV [%]
Kontrolní hladina 1	1,54	0,02	1,1
Kontrolní hladina 2	15,7	0,1	0,9
Lidská moč 1	5,0	0,05	1,0
Lidská moč 2	10,5	0,1	1,1

MEZILEHLÁ PRECIZNOST

Celkem	Průměr [mmol/l]	SD [mmol/l]	CV [%]
Kontrolní hladina 1	1,51	0,01	1,0
Kontrolní hladina 2	15,4	0,1	0,8
Lidská moč 3	4,86	0,05	1,0
Lidská moč 4	10,3	0,1	0,8

LIKVOR:

OPAKOVATELNOST

V sérii	Průměr [mmol/l]	SD [mmol/l]	CV [%]
Precinorm U	5,43	0,04	0,8
Precipath U	13,6	0,1	0,8
Lidský CSF 1	3,04	0,03	0,9
Lidský CSF 2	8,43	0,08	1,0

MEZILEHLÁ PRECIZNOST

Celkem	Průměr [mmol/l]	SD [mmol/l]	CV [%]
Precinorm U	5,37	0,07	1,3
Precipath U	13,4	0,2	1,1
Lidský CSF 3	3,0	0,04	1,5
Lidský CSF 4	8,3	0,1	1,2

Korelace s jinou metodou: Hodnoty GLUK získané na analyzátoru Roche/cobas c501 byly porovnány s hodnotami stanovenými použitím odpovídající reagencie na analyzátoru Roche/MODULAR P

Typ vzorku

Počet vzorků

Rovnice

Passing/Bablok

Korelační koeficient

Rozmezí vzorku

sérum/plazma

y=1,00x- 0,118

0,983

1,64– 34,1 mmol/l

Typ vzorku

Počet vzorků

Rovnice

Passing/Bablok

Korelační koeficient

Rozmezí vzorku

moč

y=1,00x- 0,060

0,972

0,16– 39,5 mmol/l

Typ vzorku

Počet vzorků

Rovnice

Passing/Bablok

Korelační koeficient

Rozmezí vzorku

CSF

y=1,00x- 0,020

0,980

1,92– 38,0 mmol/l

Aktuální charakteristiky spolehlivosti:

Aktuální charakteristiky spolehlivosti jsou uvedeny v platném verifikačním protokolu glukózy v séru, plazmě, moč a likvoru pro analyzátor ROCHE cobas 6000, modul c 501.

OSN-SDokumentace, zpracování dat a vydávání výsledkůOSN-E

Hodnoty výsledků stanovení glukózy v séru, plazmě, mozkomíšním moku se udávají na dvě desetinná místa, v mmol/l.

Hodnoty výsledků stanovení glukózy v moči se udávají na jedno desetinné místo, v mmol/l.

Poznámka: Přepočet starších jednotek používaných dříve pro glukózu: mg/dl x 0,0555 = mmol/l.

Výsledky stanovení jsou uloženy v softwaru analyzátoru, další pracovní den jsou ráno před začátkem provozu archivovány na externí disk. Všechny výsledky se také archivují v elektronické formě v laboratorním informačním systému a denně je zálohována hlavní kniha

Lékařům na odděleních a ambulancích Nemocnice Agel Ostrava Vítkovice a.s. jsou výsledky vyšetření k dispozici elektronicky v NIS a v případě potřeby v tištěné podobě u příjmového okna v laboratoři.

Spolupracujícím lékařům jsou výsledky zasílány průběžně elektronicky a následující den doručovány v tištěné podobě se svozem biologického materiálu.

Výsledkový list obsahuje:

· identifikaci laboratoře, která výsledek vydala

· odkaz na akreditaci laboratoře

· datum a čas vydání nálezu

· jednoznačnou identifikaci pacienta

· zdravotní pojišťovnu pacienta

· identifikaci požadujícího subjektu (lokalizaci pacienta, je-li to vhodné)

· identifikaci požadujícího lékaře (resp. oddělení)

· diagnózu pacienta

· druh biologického materiálu (např. sérum, plazma, moč, krev u vyšetření krevního obrazu)

· jasně srozumitelnou identifikaci vyšetření

· datum a čas přijetí vzorku laboratoří

· datum a čas odběru vzorku,

· výsledek vyšetření s odpovídajícími jednotkami (nejčastěji SI jednotky)

· označení akreditované metody

· referenční meze

· interpretaci výsledků, je-li to nutné

· jiné poznámky (např. kvalita nebo dostatečnost primárního vzorku, pokud tato může nežádoucím způsobem ovlivnit výsledek požadovaného vyšetření)

· identifikaci osob, které výsledkovou zprávu kontrolovaly a schválily

· zkratky identifikující žádanku

př. 20.BR-0777

· 20: den v měsíci, BR: biochemie rutina, 0777: číslo vzorku

· př. 20.HH-0777

· 20: den v měsíci, HH: hematologie, 0777: číslo vzorku

OSN-SReferenční a varovná rozmezíOSN-E

Zdroj doporučení ČSKB, příbalový leták, lékařský konsenzus:

V séru, plazmě:

0 – 1D 2,2 – 3,3 mmol/l

1D – 1M 2,8 – 4,4 mmol/l

1M – 18 let 3,3 5,6 mmol/l

18 – 150 let 3,5-5,6 mmol/l

V moči: 0,3 – 0,96 mmol/l

V likvoru: 2,50 – 4,0 mmol/l

OSN-SInterpretace výsledků, konzultační činnosti a hlášeníOSN-E

Pro diagnostiku diabetes mellitus v souvislosti s hodnotami glykémie v krvi se uvádí následující cut off hodnoty pro krev odebranou do antiglykolytického činidla (EDTA a NaF):

1) Výsledek v náhodně odebraném vzorku krve je ≥ 11,1 mmol/l.

2) Hladina glukózy v krvi nalačno je ≥ 7,0 mmol/l.

3) Koncentrace glukózy v krvi 2 hodiny po jídle, nebo při orálním glukózovém tolerančním testu je ≥ 11,1 mmol/l.

Jestliže je alespoň jedno z uvedených kriterií pozitivní v opakovaných vyšetřeních s časovým odstupem, je diagnosa diabetu mellitu považována za prokázanou. Při hladinách glykemie na lačno 5,6 – 7,0 mmol/l, nebo při rozporech mezi různými vyšetřeními stejného pacienta se provádí oGTT (orální glukosový toleranční test), který spočívá v měření glykémie 2 hodiny po podání 75 gramů glukosy, viz PI-OKBH-07 Provedení o-GTT.

Vzhledem k obtížnosti testu, intraidividuální a analytické variabilitě a riziku podání glukosy u pacienta s vysokou glykemií se oGTT neprovede, pokud glykémie nalačno u daného pacienta je v den vyšetření větší než 7,1 mmol/l.

Ke zvýšení či snížení hladiny glukózy může dojít i z jiných příčin, než je diabetes mellitus (intravenózní výživa, silný stres, cévní mozková příhoda, nadměrná produkce inzulinu, hladovění, aj.)

Například:

Snížení sérové (plazmatické) koncentrace glukózy:

- hyperinzulinismus (málo alfa-buněk pankreatu, inzulinóm)

- relativní hyperinzulinismus (adrenokortikoidální nedostatečnost, léze hypotalamu)

- hladovění

- endokrinopatie (hypotyreóza, hypopituitarismus)

- intolerance fruktózy

- abusus alkoholu

- vliv některých léků (např. salicyláty)

- špatné ukládání či mobilizace glykogenu (jaterní onemocnění – akutní hepatitida, cirhóza)

- nedostatečné zásoby glykogenu v játrech (novorozenci, cirhotici)

Zvýšení sérové (plazmatické) koncentrace glukózy:

- diabetes mellitus

- onemocnění pankreatu (akutní i chronická, hemochromatóza, karcinom pankreatu)

- onemocnění ledvin

- vliv některých léků (glukokortikoidy, adrenalin, fenothiaziny, perorální kontraceptiva)

- jaterní onemocnění

- jiné (infarkt myokardu, popáleniny, stres, akutní krvácení, hemodialýza, úrazy, pooperační stavy)

- onemocnění CNS (tumory, krvácení do mozku, edém mozku, encefalitida)

- preanalytická chyba (odběr vzorku po jídle)

Zvýšení hladiny glukózy v moči:

- diabetes mellitus

- sepse

- akutní pankreatitida

- Cushingův syndrom

- nádory nadledvin a hypofýzy

- akutní renální selhávání

- podání kortikoidů, adrenalinu, hormonů štítné žlázy

- glykosurie v těhotenství

- hepatopatie

Snížení hladiny glukózy v likvoru:

- akutní bakteriální infekce (pozn.: při virové infekci je hladina většinou normální)

Postup pro nahlášení kritické hodnoty výsledku laboratorního vyšetření je uveden ve směrnici S-OKBH-012 Směrnice pro vydávání výsledků.

OSN-SŘízení kvalityOSN-E

SÉRUM, PLAZMA

Ke kontrole a řízení kvality pro stanovení Glukosy v séru, plazmě se používá tekutý kontrolní materiál firmy Biorad Liquid Assayed Multiqual se sérovou matricí ve třech rozmezích koncentrace pro Glukosu měřenou na biochemickém analyzátoru ROCHE Cobas 6000/c501.

Příprava:

Tekutá kontrolní séra se uchovávají zamražená při teplotě -20°C.

Před použitím se nechá kontrola za laboratorní teploty a bez přístupu přímého světla pozvolna rozpustit za občasného promíchání kroužením lahvičky pro zajištění homogenity materiálu. Netřepe se, aby se zabránilo tvorby pěny. Z rozmraženého materiálu se připraví alikvoty, které jsou uchovány v lednici při +2 až +8 °C. Před použitím se opatrně alikvot promíchá pro zajištění homogenity vzorku kontroly.

Stabilita:

Tekutá kontrolní séra se uchovávají zamražená při teplotě -20°C, v tom případě jsou stabilní až do doby exspirace vyznačené na obale. Připravené alikvoty kontroly se uchovává v v lednici při +2 až +8 °C do spotřebování, nejdéle 1 týden.

Použití:

Měření kontrolního materiálu se provádí denně na dvou hladinách, po každé kalibraci, při výměně setu stejné šarže. Výsledky jsou kontrolovány pověřeným pracovníkem. Postupuje se podle směrnice S-OKBH-004 Směrnice pro IKK

Dokumentace:

Výsledky interní kontroly kvality jsou uchovávány v softwaru přístroje, zálohovány na externí disk a elektronicky přenášeny do programu LIS a Unity Real Time. Kontrola kvality je v LIS rovněž validována vedoucím úseku. Dlouhodobě jsou výsledky kontrol sledovány v programu UnityRealTime firmy Biorad a 1x měsíčně provedeno celkové měsíční zhodnocení výsledků kontrol vedoucím úseku.

Součástí kontroly a řízení kvality je pravidelná účast na mezilaboratorních kontrolách kvality organizovaných v rámci České republiky společností SEKK. Laboratoř se jí účastní alespoň 2x ročně.

MOČ

Ke kontrole a řízení kvality pro stanovení glukózy v moči se používá tekutý kontrolní materiál firmy Biorad Liquichek Urine chemistry control hladina 1,2 (katalog.číslo 397,398) s močovou matricí ve dvou rozmezích koncentrace pro glukosu měřenou na biochemickém analyzátoru ROCHE Cobas 6000,c501

Příprava:

Tekuté kontrolní moče se uchovávají v lednici při teplotě +2 až +8 °C a jsou připravena k okamžitému použití po důkladném promíchání pro zajištění homogenity kontroly.

Stabilita:

Tekuté kontrolní moče se uchovávají v lednici při teplotě +2 až +8 °C, v tom případě jsou stabilní až do doby exspirace. Používaná lahvička s kontrolní močí se uchovává v v lednici při +2 až +8 °C do spotřebování, tak aby se zabránilo kontaminaci, nejdéle 30 dní.

Použití:

Měření kontrolního materiálu se provádí denně na dvou hladinách, po každé kalibraci,, při výměně setu Výsledky jsou kontrolovány pověřeným pracovníkem. Postupuje se podle směrnice S-OKBH-004 Směrnice pro IKK

Dokumentace:

LIKVOR

Ke kontrole a řízení kvality pro stanovení GLUKOSY V CSF se používá tekutý kontrolní materiál firmy Biorad Spinal Fluid Conrol hladina 1,2 (katalog.číslo 750x ) ve dvou rozmezích koncentrace pro glukosu v likvoru.

Příprava:

Tekuté kontrolní materiály se uchovávají v lednici při teplotě +2 až +8 °C a jsou připravena k okamžitému použití po vytemperování na laboratorní teplotu 18-25 °C a po důkladném promíchání pro zajištění homogenity kontroly.

Stabilita:

Tekuté kontrolní materiály se uchovávají v lednici při teplotě +2 až +8 °C, v tom případě jsou stabilní až do doby exspirace. Používaná lahvička se uchovává v lednici č.10 při +2 až +8 °C do spotřebování, tak aby se

zabránilo kontaminaci, nejdéle 30 dní.

Použití:

Kontrola na GLC v likvoru se provádí 2x týdně v pondělí, středa, po kalibraci, po výměně roztoků.

Dokumentace:

OSN-SPoznámkyOSN-E

nevyplněno

OSN-SJiné související informaceOSN-E

nevyplněno

OSN-SLiteraturaOSN-E

Masopust, J.: Klinická biochemie. Požadování a hodnocení biochemických vyšetření. Karolinum, Praha,
1998, ISBN 80-7184-649-3.
Thomas, L.Clinical laboratory diagnostice,1998.p.131-7
Racek, J. et al: Klinická biochemie. Galén, Praha, 2006, ISBN 80-7262-324-9.
Kolektiv autorů: Preanalytická fáze 2005. Česká společnost klinické biochemie ČLS JEP a SEKK, spol,s r. o., Praha, 2005, ISBN 80-239-5198-X.
Vnitřní materiály, společnosti ROCHE

OSN-SAppendixyOSN-E

nevyplněno

OSN-SAutorské poznámkyOSN-E

nevyplněno

OSN-SRecenze, schváleníOSN-E

Autor: Mgr. Pavlína Babičová