OSN-SAbstraktOSN-E

Parametry krevního obrazu, retikulocytů a diferenciálního rozpočtu leukocytů stanovené na automatickém analyzátoru krevních buněk Sysmex XN-1000 metodou průtokové fluorescenční cytometrie-FCM s polovodičovým laserem.

 

OSN-SSeznam souvisejících dokumentů

Laboratorní příručka

Příručka kvality

Provozní řád

Skartační řád

S-OKBH-004 Směrnice pro IKK-OKBH

S-OKBH-005 Směrnice EHK

PI-OKBH-31 Provedení kontrol hematologie

LP C-11 Informace k transportu vzorků

SOPT – Hematologický analyzátor Sysmex XN-1000

SOPV – Hodnocení nátěru PK

PI-OKBH-86   Manuál Sysmex XN-1000

 

OSN-SKódy, názvy, definice a terminologie

Krevní obraz a diferenciální rozpočet leukocytů, retikulocyty

Reagenční souprava: Roztoky a činidla v kapitole Reagencie

Název a klíč v lokálním číselníků LIS: Krevní obraz 7 parametrů (BKO)

Krevní obraz a pětipopulační diferenciál (BKOD5)

Číslo metody v lokálním číselníku LIS: Krevní obraz 7 parametrů-722

                                                Krevní obraz a pětipopulační diferenciál-723                                                                                                             

Seznam zdravotních výkonů VZP:96163 Kompletní krevní obraz se 7 parametry (včetně destiček)

   96167 Stanovení kompletního hemogramu a 5-ti populačního rozpočtu   

   Leukocytů

                                                   96857 Stanovení počtu retikulocytů na automatickém analyzátoru

 

OSN-ECBC = cell blood count (picture) – krevní obraz (KO)

                                                                                                Forma vydávání výsledků

WBC

= white blood cell count – leukocyty

x.x [109/l]

RBC

= red blood cell count – erytrocyty

x.xx [1012/l]

HGB

= hemoglobin

x [g/l]

HCT

= hematokrit (měřeno integrací napěťových pulzů

 

x,xxx

MCV

= mean corpuscular volume-střední objem erytrocytů, vypočtená hodnota dle vzorce: MCV=Hct/RBC

 

xx.x [fl]

MCH

= mean corpuscular hemoglobin – barvivo v erytrocytu vypočtená hodnota dle vzorce:

MCH =  Hgb / RBC

xx.x [pg]

MCHC   = množství hemoglobinu v erytrocytární mase

                 vypočtená hodnota: MCHC=HGB/(HCT.1000)                       xxx g/l

RDW   = red cell volume distribution width –

                šíře distribuce erytrocytů                                                           x.x [%]

PLT     = platelet count - krevní destičky                                          x [109/l]

PCT     = plateletcrite – destičkový hematokrit                                             0,xxx

MPV   = mean platelet volume – střední objem trombocytů                        xx.x [fl]

 

PDW   = platelet distribution width –

                 šíře distribuce krevních destiček                                       xx.x [%]

 

NRBC    = normoblasty                                                                              x.xx [109/l] v %

 

RET       = retikulocyty                                                                                x.xxx [1012/l]

 

Ret-He   = hemoglobin v retikulocytu                                                         xx.x pg

 

IPF        = nezralé frakce trombocytů                                                         xx.x %

 

 

OSN-SPrincipOSN-E

Impedanční princip s hydrodynamickou fokusací

Měření probíhá v komoře, kam je nasát vzorek naředěný vodivým diluentem. Přesně stanovené množství ředěného vzorku je pak pomocí vakua z této komůrky nasáváno malým otvorem, jehož průměr je srovnatelný s velikostí buňky. Po obvodu měřící kyvety protéká vyšší rychlostí vodící kapalina (sheath reagent) a proudem nosné kapaliny jsou buňky unášeny a řazeny za sebou. Otvorem (apertura) prochází stejnosměrný proud, který neproniká do cytoplazmy. Při průchodu buňky je z plochy apertury vytlačena část diluentu a změní se elektrický proud procházející aperturou. Tyto změny jsou snímány jako impulsy, jejichž amplituda je přímo úměrná velikosti buňky. Analyzátor tedy současně s počtem impulsů – s počtem procházejících buněk – změří i jejich objem. Počet impulzů v přesném malém objemu přepočte na objemovou jednotku, velikost impulsu zprůměruje a vydá ji jako střední objem buňky. Softwarem lze stanovit meze velikosti typické pro určité buňky, a tak lze současně při průchodu jednou aperturou měřit více druhů buněk (erytrocyty a trombocyty).

Erytrocyty a trombocyty se stanoví ze stejného ředění vzorku a jsou odlišeny velikostí buňky. Za trombocyt je považována buňka velikosti 1-4 µm, větší jsou začleněny mezi erytrocyty. Leukocyty jsou stanoveny z menšího ředění a pro vyloučení rušivých vlivů erytrocytů a trombocytů je do naředěného vzorku přidáváno lyzační činidlo, které lyzuje všechny buňky (včetně leukocytů-dochází k částečnému nebo úplnému rozrušení cytoplazmy a WBC se hodnotí v pozici částečného narušení membrány nebo se hodnotí jen jádro). Počet impulzů a jejich velikost je roztříděna a graficky zobrazena ve formě histogramu. Je to křivka, kde na ose x je amplituda impulzu – objem buňky a na ose y počet stejně velkých impulsů – počet buněk. Ideálně má tvar Gaussovy křivky.

Impedanční princip je využíván v analyzátorech největší měrou. Jeho nevýhody vyplývají z principu a patří sem zejména interference mezi různými typy buněk. Modernější automaty jsou schopny mnoho z těchto interferencí odhalit, nebo alespoň textovou zprávou (flagg) na možnost interference upozornit.

  

Stanovení hemoglobinu

Je stanovován spektrofotometricky.

Měření se provádí z ředění vzorku určeného pro počítání leukocytů. Po ukončení počítání leukocytů je z lyzační komůrky převedeno přesně změřené množství vzorku do hemoglobinového fotometru. Zde je vzorek opakovaně změřen při vlnové délce 540 nm. Dle míry absorpce světla je možné určit množství hemoglobinu a přepočtem i jeho hladinu v původním vzorku plné krve. Stanovení je prováděno několikrát, nejnižší a nejvyšší hladina je z průměru vynechána. Po ukončení měření je komůrka vypláchnuta detergentem a ten je opět několikrát proměřován – určí tzv. blank, se kterým je pak porovnávána absorbance světla vzorkem.

 SLS metoda měření koncentrace hemoglobinu.

Látka sodium lauril sulfát (SLS) obsažena v lyzačním činidle způsobí následné chemické reakce – hemolýzu erytrocytů, konfirmační změny v molekule globinu, oxidaci železa a vznik komplexu SLS – hemoglobin.

V materiálu k měření hemoglobinu jsou přítomna i leukocytární jádra. Analyzátor automaticky koriguje výpočtem hladinu hemoglobinu dle počtu leukocytů. Leukocytosa v oblasti hraniční pro linearitu přístroje může hladinu hemoglobinu ovlivnit. Vzorek je potřeba pak změřit naředěný.

Interference-chylosita vzorku, leukocytosa.

Chylosní vzorek lze změřit v ředění, a pokud ani toto nestačí, lze vzorek promýt. Po centrifugaci 5 minut při 1500 rpm odsajeme vrstvu plazmy a přesně změříme její objem. Do vzorku přidáme stejný objem diluentu. Někdy je nutné promýt vzorek opakovaně. Získaná hladina hemoglobinu má větší chybu a je nutné na toto upozornit v poznámce vydávané současně s výsledkem. Se změnou hodnoty hemoglobinu ve výsledku musíme i přepočíst parametry vypočtené z hladiny hemoglobinu.

 

Optická metoda měření počtu leukocytů.

Kanál pro leukocyty a bazofily: kyselé složky reagencie způsobí lýzu erytrocytů, trombocytů a všech leukocytů (zůstanou tzv. holá jádra) kromě bazofilů. Po expozici laserovým paprskem analyzátor snímá dva signály – rozptyl přímého paprsku, jehož intenzita informuje o velikosti buňky a rozptyl bočního paprsku, jehož intenzita informuje o vnitřní struktuře buňky a odseparuje tak populaci bazofilů od ostatních leukocytů. Celkový počet leukocytů je dán součtem bazofilů a ostatních leukocytů. 

 

Stanovení retikulocytů optickou metodou spočívá v intravitálním obarvení (metylenová modř) a poté v analýze vzorku laserem. Erytrocyty jsou, pokud nejsou lyzovány, zachyceny v čidle 10°a retikulocyty ještě lomí a polarizují světlo-registrace 90°. Tato dvojí registrace je pro retikulocyty s obarvenou RNA v plazmě typická a umožní určit procento retikulocytů ve změřeném počtu erytrocytů. Stanovení absolutního počtu je pouze přepočtem na počet erytrocytů.

 

Fluorescenční průtoková cytometrie-optická metoda. Přístroj využívá kombinace průtokové cytometrie a rozptylu laserového paprsku.

Princip: Velikost úhlu rozptylu přímého laserového paprsku je přímo úměrná velikosti buňky (detektor Forward Scatter), intenzita bočního rozptylu laserového paprsku je přímo úměrná hustotě vnitřní struktury buňky (detektor Side Scatter) a intenzita fluorescenčního záření vycházející z buňky je přímo úměrná aktivitě a nepřímo úměrná stupni vyzrálosti buňky (detektor Side Fluorescence Light.

Fluoreccenční průtoková cytometrie využívá dvou měřících systémů ke stanovení buněk, každý z nich využívá jiné lyzační činidlo s různou účinností a odlišné způsoby detekce buněčných populací:

a)      měřící systém (channel) ke stanovení neutrofilů, eozinofilů, monocytů a lymfocytů

b)      měřící systém (channel) ke stanovení bazofilů.

ada) lyzační činidlo způsobí destrukci RBC a PLT a perforuje membránu WBC, kterou pronikne barvivo,které

        se váže na DNA, RNA v jádře a cytoplazmě (intenzita fluorescence odpovídá množství nukl.kyselin),

        intenzita bočního rozptylu informuje o členitosti jádra a obsahu granulí, organické kyseliny v lyzačním  

        činidle se specificky váží k eozinofilním granulím a tím jsou odlišeny od neutrofilů, velikost signálu je

        úměrná objemu buněk, počet detekovaných buněk (jader)odpovídá počtu WBC

adb) kyselé složky lyzačního činidla způsobí lýzu RBC, PLT, WBC (zůstanou holá jádra) kromě basofilů

        (jsou větší a komplexnější než holá jádra ostatních WBC)

Celkový počet WBC je dán součtem basofilů a ostatních leukocytů. 

 

OSN-SMísto provádění postupu

OKBH, úsek hematologie, Nemocnice AGEL Ostrava-Vítkovice a.s. Zalužanského 1192/15,70384 Ostrava-VítkoviceOSN-E

 

OSN-SBezpečnostní aspekty

Je nutné dodržovat obecné zásady bezpečnosti práce podle ČSN 01 8003, směrnice VN BOZP č.8.02, ale i zásady práce s biologickým materiálem, který může být zdrojem přenosu některých infekcí. Zejména je třeba zachovávat pravidla osobní hygieny, používat osobní ochranné pracovní prostředky (oděv, obuv a podobně), při práci nejíst, nepít a nekouřit. Po práci a před jídlem omýt pokožku především rukou teplou vodou a mýdlem a ošetřit vhodným reparačním krémem. Při zasažení očí vymývat velkým množstvím vlažné vody nejméně 15 minut. Při zasažení oděvu a kůže odložit veškeré kontaminované oblečení. Okamžitě kůži omýt velkým množstvím, pokud možno vlažné vody, popř. mýdlem nebo jiným vhodným mycím prostředkem. Po umytí ošetřit vhodným reparačním krémem. S-OKBH-003 Směrnice o práci s biologickým materiálem

OSN-E

OSN-SFáze před vyšetřením

Výsledky krevního obrazu poskytují informaci nejen o počtu, ale také o velikosti a některých dalších charakteristikách krevních buněk. Krev se skládá z krevních buněk rozptýlených v tekutině nazývané plazma. Tyto buňky (zralé červené a bílé krvinky a krevní destičky) jsou produkovány kostní dření a uvolňovány dle potřeby organismu do krevního oběhu. Doplňujícími vyšetřeními krevního obrazu mohou být nátěr periferní krve a diferenciální rozpočet leukocytů.

OSN-E

OSN-SOdběr primárního vzorku a transportOSN-E

Odběr

           Odběr se provádí standardním způsobem ze žilní krve, do plastové zkumavky s K3EDTA, K2EDTA,

            pro obvyklé vyšetřování je vhodný odběr ráno, nevyžadují se striktní dietní opatření.

            Pro stanovení trombocytů k vyloučení pseudotrombocytopenie se provede odběr krve do speciální 

            zkumavky (Monovette TromboExact f.Sarstedt) nebo zkumavky s citrátem sodným (1:9).

Transport

Transport materiálu na oddělení OKBH VTN je popsán v laboratorní příručce LP C-11 Informace k transportu vzorků. Transport materiálu musí být šetrný, rychlý, při teplotě +15 až+25°C. Doba transportu nesmí trvat déle než 2 hod.

Skladování

Zkumavka se vzorkem se po provedení analýzy skladuje při +15 až + 25°C 24 hod. Doba dodatečně požadovaných vyšetření se řídí podle seznamu uvedeném v LP C-03 Ústní požadavky na vyšetření.

Interference

Extrémní lipémie, vysoký bilirubin, chylomikrony, hemolýza.

Stabilita

+15 až+25°C: 5 hodin

 

OSN-SOmezeníOSN-E

Laboratoř může odmítnout přijetí materiálu a neprovést požadované vyšetření z obecných důvodů uvedených v Laboratorní příručce v kapitole Kritéria pro přijetí nebo odmítnutí primárních vzorků.

Nedostatečné promíchání, nesprávné skladování a transport může vést k nesprávným výsledkům.

V případě nesprávného odběru a vzniku sraženiny ve vzorku není stanovení provedeno.

 

Interference a limity:

1. Některé natrvalo srpkovité buňky, které se objevují v případě srpkovité anémie, se nemusí v systému zcela seskupit, čehož výsledkem je zvýšené RDW a tím pádem podhodnocení MCV. Srpkovité buňky mohou způsobit chybné výsledky u dalších parametrů RBC.

2. Velmi vysoké počty WBC (>100 x 10³ buněk/μl) zvyšují počet RBC, HGB a HCT

3.Vzorky s chladovými aglutininy mohou mylně snížit počet RBC, HCT, falešně zvýšené MCHC  

4. Vzorky s extrémní lipémií, chylomikrony nebo extrémně vysokým bilirubinem mohou způsobit interferenci a zvýšit výsledky HGB, falešně zvýšené MCHC.

5. Vzorky pacienta s jadernými RBC-rezistentní vůči lýze, NRBL (zejména neonatální vzorky) mohou mylně zvýšit počet WBC

6. Vzorky pacientů, kteří dostávají úplnou parenterální výživu (TPN) včetně podávání vysokých dávek lipidů, mohou způsobit mylně zvýšené počty krevních destiček. Tyto vzorky mohou zahrnovat kapénky lipidů, které se objevují v oblasti počítání krevních destiček, a tím zvýšit počet krevních destiček.

7.Snížený počet PLT-pseudotrombocytopenie-způsobuje antikoagulační roztok, shluky PLT a velké PLT

8.Zvýšený počet PLT způsobují fragmenty RBC, WBC a mikro RBC. 

9.Snížení WBC-způsobuje agregace WBC, zvýšení WBC způsobují shluky PLT

10.Mikroerytrocyty a fragmenty RBC snižují počet RBC a HCT

11.Abnormální proteiny zvyšují HGB.

12.Urémie, silný diabetes a sférocytoza zvyšují HCT.

13. Agregace RBC, velké PLT, shluky PLT, fragmenty WBC, Howell-Jollyho těl. mohou zvyšovat RET

14. Pseudohyperkalémie: Při hodnotě WBC> 50 109/l nebo PLT> 1000 109/l dochází k falešnému zvýšení draslíku. Při hodnotě K> 5,5 mmol/l doporučujeme odběr plazmy (heparin).

 

OSN-SManipulace se vzorkyOSN-E

Pro uzavřený i otevřený systém je použita jedna aspirační jehla. Vzorek je před měřením nutné promíchat převracením-ne třepáním. Před uložením do podavače je nutné každý vzorek prohlédnout na přítomnost sraženin, vzorky na vyšetření krevního obrazu měříme nejdříve po 15-20 min. po odběru, při vyšetření diferenciálního rozpočtu leukocytů po 30 min. od odběru, aby došlo k vyrovnání koncentračních gradientů po styku s antikoagulantem.

 

OSN-SPřístroje a pomůckyOSN-E

Sysmex XN-1000 - automat s měřením krevního obrazu s 5-ti populačním diferenciálem a retikulocyty,

s možností měření vzorků z podavače uzavřeným modem, nebo s otevřeným způsobem měření. 

 

OSN-SReagencieOSN-E

Výrobce – Sysmex s.r.o, Elgartova 683/4,614 00 Brno

Zásadně je nutné užívat originální reagencie doporučené pro typ přístroje, jsou určené k přímému použití.

                                      Kat.č.

Cellpack DCL             CT661628                 

Sulfolyser SLS                        904-1141-4

Cellclean CL-50         934-0172-9

Cellpack DFL             BT965910

Fluorocell PLT                        CD994563

Fluorocell RET                       BN337547

Fluorocell WDF                      CV377552

Fluorocell WNR                     CP066715

LyserCell WDF                      AL337564

LyserCell WNR                      BL121531

 

Skladování: Reagencie jsou skladovány při +15 až +30 °C.

Stabilita: Reagencie jsou stabilní do doby exspirace, která je uvedena na každém balení. Stabilita v přístroji

  při +15až+30º C 90dnů.

Manipulace s reagencií: Reagencie jsou připraveny k přímému použití, výměna reagencií se provede dle

                                     pracovní instrukce PI-OKBH

Způsob likvidace: Likviduje se jako biologický materiál.

 

OSN-SSpotřební materiálOSN-EOSN-E

Ochranné rukavice

Čistící prostředek-Savo

Další spotřební materiál dle aktuální potřeby dodaný firmou

 

OSN-SPříprava k činnostiOSN-E

Provede se denní údržba dle pracovní instrukce PI-OKBH-   Manuál Sysmex XN-1000 a kontrola pozadí.

 .

OSN-SPracovní postupOSN-E

Viz.SOPT – Hematologický analyzátor Sysmex XN-1000

Viz.PI-OKBH-86 Manuál Sysmex XN-1000OSN-E

Vzorky je možné zpracovat v tzv. otevřeném nebo uzavřeném systému. Při otevřeném zpracování se materiál promíchá, vkládá se každý vzorek jednotlivě, a to buď uzavřený, nebo otevřený obsluhou. Při práci v uzavřeném systému ukládáme zkumavky se vzorky do racku a ty vložíme do podávacího prostoru analyzátoru. Vzorky jsou dopravovány, míchány, aspirovány a analyzovány.

 

OSN-SStručný popis postupuOSN-E

1. zapneme přístroj (jednotka IPU) probíhá automaticky inicializace přístroje a kontrola jednotlivých částí (mikroprocesor, mechanické části, teplota, tlak a pozadí). 

2. provedeme denní kontrolu kvality

3. zkumavky vložíme do racku a umístíme do podavače

4. výsledky jsou průběžně odesílány do LIS a validovány obsluhou

 

OSN-SKalibrace a návaznostOSN-E

Přístroje jsou výrobcem kalibrovány, a pokud jsou výsledky průběžné kontroly kvality v referenčních mezích, není nutné kalibraci opakovat. Případné doladění je možné změnou jednotlivých kalibračních faktorů.

 

OSN-SCharakteristika spolehlivostiOSN-E

Charakteristika spolehlivosti viz. manuál Sysmex XN-1000.

Variační koeficienty přesnosti

Parametr

 

WBC

do 3,0%

RBC

do 1,5%

HGB

do 1,0%

HCT

do 1,5%

MCV

do 1,0%

PLT

do 4,0%

 

Aktuální charakteristiky spolehlivosti:

Aktuální charakteristika spolehlivosti je uvedena v platném verifikačním protokolu pro parametry krevního obrazu pro analyzátor Sysmex XN-1000.

 

OSN-SDokumentace, výpočty, zpracování dat a vydávání výsledkůOSN-E

Primární výsledky vyšetření z analyzátorů se automaticky zálohují na síťové uložiště NAOV.

 Výsledky vyšetření zanesené v LIS laboratoře se archivují v elektronické podobě.OSN-E

OSN-E Likvidace se řídí skartačním řádem.

 

Lékařům na odděleních a ambulancích Nemocnice Agel Ostrava Vítkovice a.s. jsou výsledky vyšetření k dispozici elektronicky v NIS a v případě potřeby v tištěné podobě na OKBH.

Spolupracujícím lékařům jsou výsledky zasílány průběžně elektronicky a následující den doručovány v tištěné podobě se svozem biologického materiálu.

Výsledková zpráva obsahuje:

·        identifikaci laboratoře, která výsledek vydala

·        odkaz na akreditaci laboratoře

·        datum a čas vydání nálezu

·        jednoznačnou identifikaci pacienta

·        zdravotní pojišťovnu pacienta

·        identifikaci požadujícího subjektu (lokalizaci pacienta, je-li to vhodné)

·        identifikaci požadujícího lékaře (resp. oddělení)

·        diagnózu pacienta

·        druh biologického materiálu (sérum, plazma, moč, krev u vyšetření krevního obrazu)

·        jasně srozumitelnou identifikaci vyšetření

·        datum a čas přijetí vzorku laboratoří

·        datum a čas odběru vzorku

·        výsledek vyšetření s odpovídajícími jednotkami (nejčastěji SI jednotky)

·        označení akreditované metody

·        referenční intervaly vyšetření

·        interpretaci výsledků, je-li to nutné

·        jiné poznámky (např. kvalita nebo dostatečnost primárního vzorku, pokud tato může nežádoucím způsobem ovlivnit výsledek požadovaného vyšetření)

·        identifikaci osob, které výsledkovou zprávu kontrolovaly a schválily

·        zkratky identifikující žádanku

·         př. 20.BR-0777

·         20: den v měsíci, BR: biochemie rutina, 0777: číslo vzorku

·         př. 20.HH-0777

·         20: den v měsíci, HH: hematologie, 0777: číslo vzorku

 

Referenční a varovná rozmezí

 

Referenční hodnoty u zdravé populace s ohledem na věk dle doporučení ČHS.

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 OSN-SInterpretace výsledků, konzultační činnosti a hlášeníOSN-E

 

Krevní obraz je běžné vyšetření, které se provádí k určení zdravotního stavu. Pokud se počty krvinek nachází ve fyziologickém rozmezí, další krevní obraz se provádí až při změně zdravotního stavu.
Vyšetření krevního obrazu se provádí k odhalení příčiny v případě, že má pacient symptomy jako jsou únava, slabost, infekce, podlitiny, krvácení. V případě zvýšení bílých krvinek je lékař schopen potvrdit přítomnost infekce a provést další testy k odhalení její lokalizace a původce. U sníženého počtu červených krvinek – anémie – jsou dále vyšetřovány změny velikosti a tvaru červených krvinek, které mohou napomoci odhalit příčinu. Tou může být snížení produkce, zvýšení ztrát, nebo zvýšení destrukce červených krvinek. V případě vyššího počtu krevních destiček lze odhalit riziko trombotických stavů. V případě nižšího počtu pak zvýšené riziko krvácení. Změny v počtu krevních destiček (PLT) provází i hematologická onemocnění, např. leukémii. Mnoho stavů může vést ke zvýšení nebo snížení počtu krevních buněk. Některé nemoci, jako jsou onkologická onemocnění (léčená chemoterapií) mohou ovlivnit produkci krevních buněk kostní dření a zvýšit produkci jednoho typu buněk na úkor jiného, nebo celkově snížit produkci krevních buněk. Některé léky mohou snížit počet bílých krvinek. Nedostatek některých vitamínů a minerálů může způsobit anémii.
Krevní obraz se provádí též k monitorování průběhu nemoci a ke kontrole léčby.

Diferenciální rozpočet bílých krvinek – rozlišení typů bílých krvinek. Každý má svoji funkci v ochraně těla proti infekci: neutrofily, bazofily, eosinofily, lymfocyty a monocyty. 

 

Leukocytóza – zvýšený počet leukocytů. Výskyt u infekční a zánětlivých on., leukemie, lymfoproliferativní on., myeloproliferativní on., otrav, popálenin, těhotenství, krvácení.

Leukopenie – snížený počet leukocytů. Výskyt u dřeňových útlumů, některé infekce, léčba imunosupresivy, leukemie (HCL, APL ..)

Neutrofilie – zvýšený počet neutrofilů. Výskyt u bakteriálních infekcí, zánětlivých on., myeloproliferativních on., těhotenství

Neutropenie – snížený počet neutrofilů. Výskyt u při poruchách imunity, u dřeňových útlumů,některých infektů, leukemie

Agranulocytóza – snížení až vymizení granulocytů. Výskyt u polékové agranulocytózy, dřeňové útlumy, protinádorová léčba, leukemie

Lymfocytóza – zvýšený počet lymfocytů. Výskyt u virových infekcí, leukemie, lymfoproliferativní on.

Lymfopenie – snížený počet lymfocytů. Výskyt u některých infekcí, po ozáření, intoxikaci.

Eozinofilie – zvýšený počet eozinofilů. Výskyt při alergiích, parazitárních on., myeloproliferativních on.

Bazofilie – zvýšený počet bazofilů. Výskyt u alergií, CML.

Monocytóza – zvýšený počet monocytů. Výskyt u MDS, chronických inf., virových inf., leukemie

Trombocytóza – sekundárně zvýšené hodnoty trombocytů. Výskyt u zánětu, stresu, léčba kortikoidy, traumata, krvácení, nádorová on., autoimunitní on.

Trombocytemie – primárně zvýšené hodnoty trombocytů. Výskyt u myeloproliferativních on.

Tromobytopenie – snížený počet trombocytů. Výskyt u imunosupresivní léčby, leukemie, lymfoproliferativní on., myeloproliferativní on., krvácení, protilátky proti trombocytům, protinádorová léčba, alkoholizmus, plastická anémie, TTP, DIC, HUS, HIT, HELLP syndrom, septické stavy, hypersplenismus

Erytrocyty

·         Snížené-anémie, dřeňový útlum, leukemie, krvácení, lymfoproliferativní on., myeloproliferativní on

·         Zvýšené–polyglobulie, polycytémie

 

Hemoglobin

·         snížený-anémie

·         zvýšený – polycytémie,polyglobulie

Hematokrit

·         snížený/zvýšený u podobných stavů,u kterých se vyskytují změny v erytrocytech

MCV

·         slouží k rozlišení mikrocytární,normocytární,makrocytární anémie

MCH

·         slouží k rozlišení anémie hypochromní,normochromní a hyperchromní

MCHC

·         snížení u hypochromní a makrocytární anémie

·         zvýšení u hereditární sférocytózy

RDW

·         zvýšení u anizocytózy erytrocytů,slouží k odlišení talasemie od sideropenické anémie

 

 

 

 

 

 

OSN-SŘízení kvalityOSN-E

Interní kontrola kvality je zajištěna měřením firemních kontrolních vzorků na 3 hladinách dle pracovní instrukce PI-OKBH-31 Vnitřní kontrola kvality-KO vycházející z doporučení ČHS ČLS JEP-Vnitřní kontrola kvality měření krevních obrazů na hematologických analyzátorech.

Příprava: Kontrolní materiál je uchováván při +2až+8ºC v lednici. Po vytemperování na laboratorní teplotu a

promíchání je připraven k použití. 

Stabilita: Při +2až+8 ºC je stabilní do doby exspirace, po otevření je stabilní 7 dnů.

 

Externí kontrola kvality v rámci České republiky je organizována společností SEKK, směrnice  S-OKBH-005 Směrnice EHK

Dokumentace: Výsledky denních kontrol se archivují v SW analyzátoru, elektronicky se přenášejí do LIS a programu Unity Real Time. V LIS jsou rovněž validovány vedoucími úseku

 

OSN-SPoznámky, zdroje variabilityOSN-E

Počet eozinofilů a monocytů bývá lehce vyšší než při mikroskopickém hodnocení.

Analyzátor není schopen rozlišit jednotlivé formy neutrofilů

Analyzátor dále v případě patologií vydává morfologické hlášky (flags) informující o snížení nebo zvýšení počtu buněk, výskytu různých anomálií nebo shluků PLT.

 

 

 

Meze parametrů, při kterých se zhotovuje nátěr 

 

Parametr

hodnota

Bílá řada

Leukocytóza

Leukopenie

≥ 30 x 109/l

≤ 2   x 109/l(neléč.)

 

Lymfocytóza

≥ 60 % nebo 10 x 109/l

 

Monocytóza

≥ 20 %

 

Nezralé granulocyty (IG)

přítomny

 

Abnormální lymfocyty

přítomny

 

Blasty

přítomny

 

Pancytopenie

WBC <4, HGB <120

       PLT <100

Červená řada

Normoblasty (NRBC)

 ≥ 10 %

PLT

 

<100x109/lpři prvozáchytu

 

<50 x 109/l 

hodnotit současně i schistocyty(≥10hlásit lékaři)

 

shluky PLT

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Kódy, názvy jednotlivých parametrů krevního obrazu v lokálním číselníku:

Kód     Klíč                 Název

705      BLE                Leukocyty

706      BERYPR        Erytrocyty

708      BHB                Hemoglobin

709      BHTC             Hematokrit

710      BMCV            Střední objem erytrocytů

712      BMCH            Střední množství hemoglobinu v erytrocytu

713      BMCHC         Střední koncentrace hemoglobinu v erytrocytech

714      BRDW-CV     Šíře distribuce erytrocytů – variační koeficient

715      BTRPR                       Trombocyty

716      BMPV             Střední objem trombocytů

717      BNE                Neutrolily

718      BEO                Eozinofily

719      BBA                Bazofily

720      BMO               Monocyty

721      BLY                Lymfocyty

971      NRBC             Normoblasty

790      BRET              Retikulocyty

981      QFI102                       Ret-He-Hemoglobin v retikulocytu

982      QFI103                       IPF-Frakce nezralých trombocytů

 

OSN-SJiné související informaceOSN-EOSN-E

Nevyplněno

 

OSN-SLiteraturaOSN-E

·         SLP 

·         Pecka, M.: Přehled laboratorní hematologie II, Galén, 1996.

·         Pecka, M.: Přehled laboratorní hematologie IV, Galén, 2000.

·         Doporučení ČHS ČLS JEP „Referenční meze krevního obrazu, retikulocytů, normoblastů a diferenciálního počtu leukocytů u dětí, 2023

·         Doporučení ČHS ČLS JEP „Referenční meze krevního obrazu, etikulocytů, normoblastů a diferenciálního počtu leukocytů u dospělých, 2021

·         Doporučení ČHS ČLS JEP-Vnitřní kontrola kvality měření krevních obrazů na hematologických analyzátorech, 2022

·         XN series (XN-1000) -Pokyny pro použití

·         Hematologický systém Sysmex XN-1000 – Příručka operátora

·         Doporučení ČHS ČLS JEP Preanalytika v hematologické laboratoři, 2021

·         Ricos C, Alvarez V, Cava F, Garcia-Lario JV, Hernandez A, Jimenez CV, Minchinela J, Perich C, Simon M. "Current databases on biologic variation: pros, cons and progress." Scand J Clin Lab Invest 1999;59:491-500.2014

 

OSN-SAppendixyOSN-EOSN-E

Nevyplněno

 

 

OSN-SAutorské poznámkyOSN-E

nevyplněno

 

OSN-SRecenze, schváleníOSN-E

Autor: Mgr. Eva Miková