PI OKBH-36 Vyšetření močového sedimentu mikroskopicky

Mikroskopické vyšetření močového sedimentu se provádí jako orientační ověření močového sedimentu změřeného na analyzátoru LabUMat 2.

Vyšetření močového sedimentu je nutno provést do 1 hodiny po odběru, jinak dochází k zániku orgánových součástí moče. K vyšetření se odebírá vzorek první ranní moče ze středního proudu, po očistě genitálií.

U moče s alkalickým pH a nízkou hustotou začíná docházet k rozpadu částic již v močovém měchýři.

Pracovní postup mikroskopického vyšetření močového sedimentu při použití plastové destičky Fast-Read 102:

Možnost č.1: využití mřížky na sklíčku

o Dodaný, řádně označený vzorek moče promíchat

o Pomocí Pasteurovy pipety odsát ze zkumavky přebytečné množství moče tak,

aby ve zkumavce zůstalo 8 ml moče (20-ti násobné zahuštění sedimentu)

o Moč centrifugovat 10 minut při 2 000 ot./min

o Po odstředění v centrifuze opatrně stáhnout supernatant do zahuštění moče 20 x (0,4 ml sedimentu)

o Sediment protřepat a napipetovat čistou špičkou na plastovou destičku Fast – Read 102

o Sklíčko vložit na křížový stolek mikroskopu, spočítat počet buněk v deseti čtvercích (1ml), počet nalezených buněk vydělit ředícím faktorem (20)

o Provádět při zvětšení 200 x tj. objektiv 20x a okulár 10x

o Výsledky jednotlivých elementů odpovídají nálezu na 1 ml moče

o Pro ověření chemického nálezu v moči se používají diagnostické proužky:

Ø NEFRO PHAN Leuco, REF:URPH0016

Ø HEPTA PHAN, REF: URPH0014

Zahuštění 20x:

Z 10 ml 0,5 ml sedimentu

Z 8 ml 0,4 ml sedimentu

Z 5 ml 0,25 ml sedimentu

Možnost č.2: prohlížení zorného pole

o Dodaný, řádně označený vzorek moče promíchat

o Pomocí Pasteurovy pipety odsát ze zkumavky přebytečné množství moče tak,

aby ve zkumavce zůstalo 8 ml moče (20-ti násobné zahuštění sedimentu)

o Moč centrifugovat 10 minut při 2 000 ot./min

o Po odstředění v centrifuze opatrně stáhnout supernatant do zahuštění moče 20 x (0,4 ml sedimentu)

o Sediment protřepat a napipetovat čistou špičkou na plastovou destičku Fast – Read 102

o Prohlížet minimálně 3 zorná pole při zvětšení 200x, tj.: objektiv 20x a okulár 10x

o Určit průměrný počet elementů na jedno zorné pole a vynásobit čtyřmi, což odpovídá nálezu na 1µl moče

o Pozn.: Pokud prohlížíme tři zorná pole při zvětšení 400x, tj.: objektiv 40x a okulár 10x, určíme průměrný počet elementů na jedno zorné pole a vynásobíme osmi, což odpovídá nálezu na 1µl moče

Pracovní postup mikroskopického vyšetření močového sedimentu při použití klasického podložního sklíčka:

o Dodaný, řádně označený vzorek moče promíchat

o Pomocí Pasteurovy pipety odsát ze zkumavky přebytečné množství moče tak,

aby ve zkumavce zůstalo 8 ml moče (20-ti násobné zahuštění sedimentu)

o Moč centrifugovat 10 minut při 2 000 ot./min

o Po odstředění v centrifuze opatrně stáhnout supernatant do zahuštění moče 20 x (0,4 ml sedimentu)

o Sediment protřepat a napipetovat čistou špičkou na podložní sklíčko

o Prohlížet minimálně 3 zorná pole při zvětšení 200x, tj.: objektiv 20x a okulár 10x

o Určit průměrný počet elementů na jedno zorné pole a vynásobit čtyřmi, což odpovídá nálezu na 1µl moče

o Pozn.: Pokud prohlížíme tři zorná pole při zvětšení 400x, tj.: objektiv 40x a okulár 10x, určíme průměrný počet elementů na jedno zorné pole a vynásobíme osmi, což odpovídá nálezu na 1µl moče.

V močovém sedimentu má klinický význam sledování těchto parametrů:

• Erytrocyt
1. 4 až 7 mm velká bikonkávní, kulatá, bezjaderná buňka
2. výskyt: izomorfní (normální): asi 80% nalezených erytrocytů, svědčí pro postrenální krvácení
3. dysmorfní (tvarově změněné, poškozené) svědčí pro renální krvácení (glomerulární).
4. Možnost záměny: kvasinky, ovoidní krystaly šťavelanu, bublinky vzduchu

• Leukocyty

o 12 až 14 mm = většinou granulocyty

o 7 mm = lymfocyt, pouze vzácně fyziologicky přítomny v malém množství

• Dlaždicovité epitelové buňky

o 40 až 60 mm, malé kulaté jádro, světlejší cytoplazma, původ: močová trubice, vagina, močový měchýř. Minimální diagnostický význam, menší množství v každém sedimentu.

• Buňky přechodného epitelu
1. 20 až 40 mm
2. Povrchové buňky jsou větší i dvoujaderné
3. Buňky z hlubší části epitelu jsou menší kulaté, mají větší jádro, možný výskyt shluků
4. Přítomnost menšího množství buněk = fyziologický nález. Větší výskyt buněk přechodného epitelu se vyskytuje při infekci močových cest.

• Renální tubulární buňky
1. 15 až 20 mm, větší excentricky umístěné jádro, buňky tvarově různé. Klinicky nejvýznamnější epitelový nález – vážné poškození ledvin.

• Válce
1. Cylindrický tvar, ostře ohraničené okraje, velikost a šíře kolísá, základní strukturou je Tamm-Horsfallův mukoprotein
2. Nález válců, mimo několika hyalinních, je vždy závažný nález

Ø Hyalinní válce: jemná struktura, snadno přehlédnutelné, po obarvení lépe hodnotitelné

Ø Granulované válce: struktura TH mukoproteinu, pokrytá jemnými nebo hrubšími granuly

Ø Buněčné válce: dle nalepených buněk na TH mukoprotein: leukocytární, erytrocytární, bakteriální

Ø Voskové válce: neprůhledné, někdy ve středu prasklé, široké

Ø Tukové a další válce: výskyt vzácně

• Bakterie
1. Normálně v močovém ústrojí nejsou přítomny. Výskyt bakterií v čerstvé moči je indikátorem zánětu
2. Tvar koky nebo tyčinky. Barvení je usmrcuje, nepohybují se.

• Další organické součásti moče
1. Kvasinky: různá velikost, potvrzení nálezu jejich dělení tj. pučení. Pozor na záměnu s erytrocyty.
2. Trichomonas vaginalis: prvok hruškovitého tvaru se 4 bičíky, nativně výrazný pohyb
3. Spermie, plísně, tukové kapénky

Anorganický močový sediment

• Význam u pacientů s urolitiázou, nutno pozorovat v čerstvé moči
• Amorfní látky: nejběžnější jsou uráty (kyselé pH) a fosfáty (alkalické pH moče)

Ø Krystaly: kyselé pH: kyselina močová (velmi variabilní)

šťavelan (oxalát) vápenatý monohydrát

šťavelan vápenatý dihydrát (tvar „psaníček“)

Ø Krystaly:alkalické pH: fosforečnan amonný, tripelfosfát (tvar „víka rakví“)

močan amonný – žluté ostnaté kuličky

HODNOCENÍ MOČOVÉHO SEDIMENTU

• Hodnocení Leuko a Ery:

Ø vydávat hodnoty přímo z analyzátoru do hodnoty 1500 elementů/µl

Ø po překročení hodnoty 1500 elementů/µl psát záplava

Ø sporné výsledky vždy mikroskopovat

• Válce vždy vyčíslovat do absolutní hodnoty.
• Epitelie rovněž vyčíslovat, při větším počtu psát četné nebo záplava.
• Dle vlastního uvážení a zkušeností je možné dopisovat dle potřeby k metodě poznámky a doporučení (chybná preanalytika, shluky elementů… atd.)

Rozhodovací kritéria pro provedení mikroskopického močového sedimentu

Mikroskopické vyšetření provádíme v těchto případech:

1. U dětí do 15 let při pH nad 7,5

2. Chemický nález moči neodpovídá počtu jednotlivých elementů v močovém sedimentu změřeném na močovém analyzátoru LabUMat 2

3. Pokud se v močovém sedimentu změřeném na analyzátoru LabUMat 2 vyskytnou „neidentifikovatelné“ útvary